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人肝永生化細胞THLE-3

人肝永生化細胞THLE-3

簡要描述:青旗(上海)生物技術發(fā)展有限公司,總部位于上海浦東新區(qū),依托本地高校資源,逐步發(fā)展成為以生物技術為主的研發(fā)、生產、培訓為一體的綜合化產業(yè)平臺,在標準化細胞庫建立及細胞藥物前端模型方面成果顯著。公司生產經營原代細胞、細胞系、ELISA試劑盒、感受態(tài)細胞和HPLC檢測等科研產品與服務。我們秉承對用戶負責的態(tài)度,以對科研的高度嚴謹,以嚴格的質量控制,為廣大生物醫(yī)學科研用戶提供更優(yōu)質的服務!

更新時間:2021-05-25

廠商性質:生產廠家

瀏覽次數(shù):863

詳情介紹
品牌其他品牌貨號BFN608006122
規(guī)格T25培養(yǎng)瓶x1 1.5ml凍存管x2供貨周期現(xiàn)貨
主要用途僅供科研應用領域醫(yī)療衛(wèi)生,生物產業(yè)

細胞名稱

人肝永生化細THLE-3                  

img1

貨物編碼

BFN608006122

產品規(guī)格

T25培養(yǎng)x1

1.5ml凍存x2

細胞數(shù)量

1x10^6

1x10^6

保存溫度

37

-198

運輸方式

常溫保溫運輸

干冰運輸

安全等級

1

用途限制

僅供科研用途

 

培養(yǎng)體系

DMEM高糖培養(yǎng)基Hyclone+10%胎牛血清Gibco+1%雙抗Hyclone

培養(yǎng)溫度

37

二氧化碳濃度

5%

簡介

人肝永生化細胞THLE-3細胞系是正常肝細胞SV40T抗原轉染得到。將含SV40T抗原BglI-HpaI片段的逆轉錄病毒載體導入兼嗜性包裝細胞PA317中生產病毒THLE-2andTHLE-3表達正常成人肝上皮細胞特征性的表型。當注射到無胸腺裸鼠中時,它們不成瘤,具有接近二倍體的核型,不表達甲胎蛋白。人肝永生化細胞THLE-3細胞由青旗(上海)生物技術發(fā)展有限公司2018年引種ATCC(CRL-11233)。

注釋

Transformant: NCBI_TaxID; 1891767; Simian virus 40 (SV40).

STR信息

Amelogenin        X

CSF1PO        11,12

D5S818        13

D7S820        8,10

D13S317        13

D16S539        11,12

TH01        8,9.3

TPOX        6,9

vWA        17,18

參考文獻

DOI=10.1007/978-1-4612-0411-4_31

Lechner J.F., Smoot D.T., Pfeifer A.M.A., Cole K.H., Weston A., Groopman J.D., Shields P.G., Tokiwa T., Harris C.C.

A non-tumorigenic human liver epithelial cell culture model for chemical and biological carcinogenesis investigations.

(In) Neoplastic transformation in human cell system. Mechanism of carcinogenesis; Rhim J.S., Dritschilo A. (eds.); pp.307-321; Humana Press; New York (1990)

 

PubMed=7685115; DOI=10.1073/pnas.90.11.5123

Pfeifer A.M.A., Cole K.E., Smoot D.T., Weston A., Groopman J.D., Shields P.G., Vignaud J.M., Juillerat M., Lipsky M.M., Trump B.F., Lechner J.F., Harris C.C.

Simian virus 40 large tumor antigen-immortalized normal human liver epithelial cells express hepatocyte characteristics and metabolize chemical carcinogens.

Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 90:5123-5127(1993)

 

PubMed=8504475; DOI=10.1093/carcin/14.5.833

Lehman T.A., Modali R., Boukamp P., Stanek J., Bennett W.P., Welsh J.A., Metcalf R.A., Stampfer M.R., Fusenig N.E., Rogan E.M., Harris C.C.

p53 mutations in human immortalized epithelial cell lines.

Carcinogenesis 14:833-839(1993)

 

Patent=US5759765

Harris C.C., Cole K.H., Lechner J.F., Reddel R.R.

Human liver epithelial cell lines.

Patent number US5759765, 02-Jun-1998

 

PubMed=23887712; DOI=10.1038/ncomms3218

Nault J.-C., Mallet M., Pilati C., Calderaro J., Bioulac-Sage P., Laurent C., Laurent A., Cherqui D., Balabaud C., Zucman-Rossi J.

High frequency of telomerase reverse-transcriptase promoter somatic mutations in hepatocellular carcinoma and preneoplastic lesions.

Nat. Commun. 4:2218-2218(2013)

 

 

驗收細胞注意事 

1、收到人肝永生化細THLE-3細胞,請查看瓶子是否有破裂,培養(yǎng)基是否漏出,是否渾濁,如有請盡快聯(lián)系。 

2、收到人肝永生化細THLE-3細胞,如包裝完好,請在顯微鏡下觀察細胞。,由于運輸過程中的問題,細胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細胞有可能從瓶壁中脫落下來,顯微鏡下觀察會出現(xiàn)細胞懸浮的情況,出現(xiàn)此狀態(tài)時,請不要打開細胞培養(yǎng)瓶,應立即將培養(yǎng)瓶置于細胞培養(yǎng)箱里靜 3-5 小時左右,讓細胞先穩(wěn)定下,再于顯微鏡下觀察,此時多數(shù)細胞會重新貼附于瓶壁。如細胞仍不能貼壁,請用臺盼藍染色法鑒定細胞活力,如臺盼藍染色證實細胞活力正常請按懸浮細胞的方法處理。 

3、收到人肝永生化細THLE-3細胞后,請鏡下觀察細胞,用恰當方式處理細胞。若懸浮的細胞較多,請離心收集細胞,接種到一個新的培養(yǎng)瓶中。棄掉原液,使用新鮮配制的培養(yǎng)基,使用進口胎牛血清。剛接到細胞,若細胞不多 血清濃度可以加 15%去培養(yǎng)。若細胞迏 80% ,血清濃度還是 10。 

4、收到人肝永生化細THLE-3細胞時如無異常情 ,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)基吸出,留 5-10ML 培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng):超 80%匯合度時,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液,1000 /分鐘離 3 分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶 

5、將培養(yǎng)瓶置 37培養(yǎng)箱中培養(yǎng),蓋子微微擰松。吸出的培養(yǎng)基可以保存在滅菌過的瓶子里,存放 4冰箱,以備不時之需。 

6、24 小時后,人肝永生化細THLE-3細胞形態(tài)已恢復并貼滿瓶壁,即可傳代。(貼壁細胞)將培養(yǎng)瓶里的培養(yǎng)基倒去, 3-5ml(以能覆蓋細胞生長面為準PBS  Hanks液洗滌后棄去。 0.5-1ml 0.25% EDTA 的胰酶消化,消化時間以具體細胞為準,一 1-3 分鐘,不超 5 分鐘。可以放37培養(yǎng)箱消化。輕輕晃動瓶壁,見細胞脫落下來,加 3-5ml 培養(yǎng)基終止消化。用移液管輕輕吹打瓶壁上的細胞,使之*脫落,然后將溶液吸入離心管內離心,1000rpm/5min。棄上清,視細胞數(shù)量決定分瓶數(shù),一般一傳二,如細胞量多可一傳三,有些細胞不易傳得過稀,有些生長較快的細胞則可以多傳幾瓶,以具體細胞和經驗為準。(懸浮細胞)用移液管輕輕吹打瓶壁,直接將溶液吸入離心管離心即可 

7、貼壁細 ,懸浮細胞。嚴格無菌操作。換液時,換新的細胞培養(yǎng)瓶和換新鮮的培養(yǎng)液,37,5%CO2 培養(yǎng)。

 

特別提醒 原瓶中培養(yǎng)基不宜繼續(xù)使用,請更換新鮮培養(yǎng)基培養(yǎng)。



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