HB101化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞

簡要描述：HB101化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞
HB101菌株是 E. Coli K12菌株和 E. Coli B 菌株的雜合產(chǎn)物（同時也是Stbl3的原始菌株）。recA13突變可有效抑制長片段末端重復(fù)區(qū)的重組，降低錯誤重組的概率；但不含核酸酶endA1突變，體內(nèi)核酸酶含量較高，提取質(zhì)粒時務(wù)必使用質(zhì)粒提取試劑盒中去蛋白液。

更新時間：2022-01-18

廠商性質(zhì)：生產(chǎn)廠家

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詳情介紹

品牌	其他品牌	貨號	BFNC86016
規(guī)格	10x100ul/50x100ul	供貨周期	現(xiàn)貨
主要用途	僅用于科研	應(yīng)用領(lǐng)域	醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè)

HB101化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞

產(chǎn)品規(guī)格CAT#: BFNC86016-01(10×100ul)/BFNC86016-02(50×100ul)

HB101： 100μl/支

pUC19 (control vector，10pg/μl): 10μl

保存條件(保質(zhì)期)： -80℃（6個月）

基因型

F- mcrB mrr hsdS20(r_B^- m_B^-) recA13 leuB6 ara-14 proA2 lacY1 galK2 xyl-5 mtl-1rpsL20((str^R) glnV44λ^-

產(chǎn)品說明

HB101菌株是 E. Coli K12菌株和 E. Coli B 菌株的雜合產(chǎn)物（同時也是Stbl3的原始菌株）。recA13突變可有效抑制長片段末端重復(fù)區(qū)的重組，降低錯誤重組的概率；但不含核酸酶endA1突變，體內(nèi)核酸酶含量較高，提取質(zhì)粒時務(wù)必使用質(zhì)粒提取試劑盒中去蛋白液。hsdS20背景使HB101缺失內(nèi)切酶系統(tǒng)，增強了外源DNA的穩(wěn)定性和提取質(zhì)量；此菌株具有鏈霉素抗性；不存在lacI^qZΔM15，不可用于藍(lán)、白斑篩選。

青旗生物生產(chǎn)的HB101感受態(tài)細(xì)胞經(jīng)特殊工藝制作，pUC19質(zhì)粒檢測轉(zhuǎn)化效率>5×10⁸cfu/μg DNA。

HB101化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞

操作方法

1. HB101感受態(tài)細(xì)胞從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA（質(zhì)?；蜻B接產(chǎn)物）并用手bo打EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。

2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰中并靜置2分鐘，晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。

3.向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基 (2YT或LB)，混勻后37℃，200 rpm復(fù)蘇60分鐘。

4. 5000 rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。

5. 將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。

注意事項

1. 感受態(tài)細(xì)胞適宜在冰中緩慢融化，插入冰中8分鐘內(nèi)加入目標(biāo)DNA，不可在冰中放置時間過長，長時間存放會降低轉(zhuǎn)化效率。

2. 混入質(zhì)?；蜻B接產(chǎn)物時應(yīng)輕柔操作。

3. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)?；蚋咝实倪B接產(chǎn)物可相應(yīng)減少終用于涂板的菌量。